生命银行细胞冻存

1.细胞冻存的操作步骤是什么？
1、配制含10%DMSO或甘油、10～20%小牛血清的冻存培养液；
2、取对数生长期的细胞，去除旧培养液，用PBS清洗。
3、去除PBS，加入适量胰蛋白酶（覆盖培养皿表面）把单层生长的细胞消化下来；
4、离心1000rpm，5min；
5、去除胰蛋白酶，加入适量配制好的冻存培养液，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，计数，调节冻存液中细胞的最终密度为5×106/ml～1×107/ml；
6、细胞分装入冻存管中，每管1～1.5 ml；
7、在冻存管上标明细胞的名称，冻存时间及操作者；
8、冻存：标准的冻存程序为降温速率-1～-2℃/ min；当温度达-25℃以下时，可增至-5℃～-10℃/min；到-100℃时，则可迅速浸入液氮中。也可将装有细胞的冻存管放入-20℃冰箱2h，然后放入-70℃冰箱中过夜，取出冻存管，移入液氮容器内。

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注意事项
1、从增殖期到形成致密的单层细胞以前的培养细胞用于冻存，最好为对数生长期细胞。在冻存前一天最好换一次培养液；
2、将冻存管放入液氮容器或从中取出时，要做好防护工作，以免冻伤；
3、冻存和复苏最好用新配制的培养液。
2.细胞冻存与复苏步骤、原理及注意事项
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Polge等人（1949）发现了甘油对低温下贮存的细胞具有保护作用，他们仍然以精子进行研究发现，加入甘油能够大大提高贮存于-790C下精子的存活率。接下来的重大进展是Luyet（1951）与Lovelock（1953）等多位学者发现了电解质浓度对贮存细胞的损伤作用。他们的结论是，电解质浓度增大是造成贮存细胞损伤的主要原因。
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“生命银行”是一种形象的比喻,它是将充满健康活性的“生命种子”——免疫细胞通过高科技手段保存下来,以备未来为自身或家人治疗重大病症提供资源的“生命健康储存”方式。从生命保险的意义上讲，免疫细胞存储又称为生命健康的“大病保单” 。
山东省齐鲁细胞治疗工程技术有限公司成立于2011年，公司以干细胞和免疫细胞技术为核心支撑，主要开展细胞技术的临床科研与转化服务、CAR-T等免疫细胞产品、拓展成人细胞存储业务、开发新型细胞衍生物系列产品，提供个体化治疗方案。涉及产业上、中、下游的全链条产品研发，是细胞治疗行业为数不多的涉及全产业链的高新技术企业。
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2015质量管理体系认证，获得卫生部颁发的室间质评证书，被山东省科学技术厅授予“高新技术企业”等荣誉称号，2020年成功获批“济南细胞组织库”2020年3月齐鲁细胞签约著名影视明星王艳为形象大使；2020年8月　齐鲁细胞自主研发的脐带间充质干细胞制剂成功通过了中检院认证；2020年11月齐鲁细胞荣获2020年度济南市院士专家工作站荣誉称号。